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紫外分光光度法測定梔子中西紅花苷的含量
更新時間:2018-10-29 點擊次數(shù):2522

:利用紫外分光光度法測定梔子中西紅花苷的含量。方法:西紅花苷線性關(guān)系分析及該方法的精密 度、重現(xiàn)性、穩(wěn)定性和回收率考察。結(jié)果:梔子中西紅花苷的平均含量為0.928%,RSD(%)0.816。結(jié)論:該方法具 有較好的線性關(guān)系,精密度、重現(xiàn)性、穩(wěn)定性和回收率都符合要求(RSD<3%);此法可以作為梔子特征成分檢驗 的依據(jù),為其質(zhì)量評價提供前期探索。

梔子,是屬于茜草科植物梔子的果實。屬于藥食兩用的 資源,同時具有護(hù)肝、利膽、降壓、鎮(zhèn)靜、止血、消腫、瀉火除 煩、清熱利尿、涼血解毒等諸多作用功效[1]。梔子中富含西紅 花苷。梔子的化學(xué)成分比較復(fù)雜,達(dá)到了一百多種[2]。西紅花 苷的外觀為呈紅棕色的粉狀物,是一類相對比較特殊的水溶 性胡蘿卜素,同時充當(dāng)著梔子中色素的主要成分,是梔子中 的主要成分之一[3-4]。 本研究旨在通過使用紫外分光光度法,研究并測定梔子 中西紅花苷的含量。由于在梔子中,相對于西紅花苷 - I 的含 量,西紅花苷 - II,西紅花苷 - III 和西紅花苷衍生物的含量極 低。所以使用西紅花苷 - I 作為標(biāo)品且將檢測結(jié)果近似作為 西紅花苷的含量。

1.2 樣品制備 稱取 2kg梔子,使用中藥切片機將其粉碎(60 目),加入 12L 70%vol 乙醇,在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中,以水浴溫度為 55℃為條 件,旋轉(zhuǎn)攪拌 2h,過濾后得到梔子乙醇溶液樣品 9.8L。 2 結(jié)果與分析 2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的的繪制 使用電子天平精密稱取標(biāo)品西紅花苷 - I10mg,置于干燥 的 100mL容量瓶中,使用體積分?jǐn)?shù)為 50%的甲醇溶液定容, 將其充分搖勻,配制成 100ppm的西紅花苷 - I 標(biāo)準(zhǔn)液。用移 液槍,精密吸取甲醇溶液 1.25mL,西紅花苷 - I 標(biāo)準(zhǔn)液 0.25mL、1.25mL、2.5mL、5mL、10mL, 并且分別都注入到一組 25mL的干燥的容量瓶中。緊接著使用體積分?jǐn)?shù)為 50%的甲 醇溶液定容,再次進(jìn)行充分搖勻。這就配制好了 1mg/L、 5mg/L、10mg/L、20mg/L、40mg/L的西紅花苷 - I 標(biāo)準(zhǔn)液。 取配制好的西紅花苷 - I 系列標(biāo)準(zhǔn)溶液,在波長 440nm 西紅花苷 - I 的大吸收波長處,逐一使用紫外分光光度計 檢測,以檢測數(shù)據(jù)吸光度為縱坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度(mg/L)為 橫坐標(biāo),繪制出了標(biāo)準(zhǔn)曲線。

繪制出西紅花苷 - I 標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖 2- 1 線性關(guān)系良好, 可以將其作為定量測定西紅花苷 - I 含量的標(biāo)準(zhǔn)曲線。并且 由 此 得 出 了 西 紅 花 苷 - I 的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為 Y = 0.1446X+0.0551, R2=0.9998, R2→1,說明兩個變量之間存在 線性關(guān)系,可以作為本試驗的標(biāo)準(zhǔn)曲線。 2.2 紫外分光光度法測定樣品精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性和回 收率 2.2.1 精密度試驗 取 1 份西紅花苷 - I 樣品,使用 50%的甲醇溶液稀釋 100 倍,使用紫外分光光度計重復(fù)檢測 5 次,結(jié)果見表 2。由表 2 可知,西紅花苷 - I 含量 RSD為 1.275%(n=5)。其 RSD值小 于 2%。結(jié)果表明儀器的精密度良好。

取 1 份西紅花苷 - I 樣品,使用 50%的甲醇溶液稀釋 100 倍,將其放置于 4℃避光保存,分別于 0、2h、4h、8h、16h、24h 使用紫外分光光度計進(jìn)行檢測,結(jié)果見表 4。由表 4 可知,西 紅花苷 - I 含量 RSD為 1.629%為(n=6)。其 RSD值小于 2%。 結(jié)果表明試驗的穩(wěn)定性良好。

2.2.4 回收率試驗 量取 3mL樣品 3 份,使用 50%的甲醇溶液稀釋 100 倍, 并配制20mg/L,40mg/L,60mg/L 的西紅花苷 - I 標(biāo)準(zhǔn)液各 2mL,加入樣品,并使用紫外分光光度計進(jìn)行檢測,結(jié)果見表 5。由表 5 可知,西紅花苷 - I 的平均回收率為 99.05%,RSD 為 0.66%(n=3)。

3 結(jié)論 通過一系列試驗,確定了西紅花苷 -I 標(biāo)準(zhǔn)曲線,且線性 關(guān)系良好,可以使用。并且進(jìn)行了紫外分光光度法的精密度、 重復(fù)性、穩(wěn)定性和回收率試驗,均符合要求,說明紫外分光光 度法這一方法可以作為試驗方法使用。使用該方法在波長 440nm 下,也就是西紅花苷 -I 的大吸收波長處,測得樣品 在使用 50%的甲醇溶液稀釋 100 倍后吸光度為 2.975,使用 西紅花苷 -I 標(biāo)準(zhǔn)曲線得出梔子中西紅花苷 -I 的含量為 1894.81mg/L。樣品總體積為 9.8L,使用梔子 2kg,可得,梔子 中西紅花苷的平均含量為 0.928%。


 



 

 

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